Умная остановка: возможности и тенденции развития
1. ОпределениеУмная остановка – интерактивная остановка, оборудованная дополнительными функциями для комфортного ожидания наземного общественного транспорта: автобусов, троллейбусов, трамваев, безопасной посадки и высадки пассажиров.
2. История создания и развития
С развитием городов и ростом численности городского населения, а, следовательно, и увеличения количества общественного и личного транспорта, возникает вопрос централизованного управления автомобильным трафиком, составление дорожных карт. Одним из составляющих решения данной проблемы методов является использование умных остановок на улицах города. Умные остановки оснащены интеллектуальной информационной системой, которая позволяет получать данные о расписании следования маршрутных транспортных средств, времени ожидания, стоимости проезда и т.д. Также такая система может служить площадкой для размещения рекламы.
Ввод в эксплуатацию умных остановок начался сравнительно недавно в 2015-2016 годах. В России первая умная остановка была установлена в Москве, сейчас такие остановки уже есть и в Санкт-Петербурге, Нижнем Новгороде, Белгороде, Кирове и ряде других городов.
3. Технические характеристики
Для предоставления информации о текущем местоположении транспортного средства умные остановки через сервер связаны с транспортными средствами, оснащенными модулями GPS/ГЛОНАСС. Пользователи могут видеть маршруты движения общественного транспорта на специальных сенсорных табло. Одной из самых используемых опций умной остановки является возможность зарядить мобильное устройство: на остановках предусмотрен ряд USB-разъемов для этой цели. Кроме того, такие остановки являются точками доступа Wi-Fi (чаще всего 100 Мбит/с). Для плохих погодных условий (в частности низкой температуры) на многих умных остановках предусмотрены теплые лавки с инфракрасными обогревателями.
Для обеспечения безопасности умные остановки оснащены системами видеонаблюдения и кнопкой тревоги для вызова полиции/скорой/пожарных. Для людей с ограниченными возможностями, например, слабовидящих или слабослышащих умная остановка может быть оснащена динамиками для озвучивания номера, прибывшего на остановку автобуса/троллейбуса/трамвая.
4. Кейсы примененияУстановка на улицах города для комфортного ожидания транспорта.
5. Полезные ссылки6. Справка об Агентстве «Цифровая Россия»
Для кого работает Агентство?
Для всех, кому необходима цифровизация. Оборудовать дом умными счетчиками по сбору данных, установить датчики на производстве, оцифровать документооборот в компании, поставить умные остановки и умные фонари на улицах и многое другое – если перед вами стоит одна из подобных задач, то мы работаем для вас!
Все подробности и возможность оставить заявку — https://agency.iot.ru/
Оптимальный набор гаджетов, комфорт и безопасность. Чем привлекательна первая интерактивная остановка
Первая умная, или интерактивная, остановка общественного транспорта, открылась 13 сентября в Минске, передает корреспондент агентства «Минск-Новости». Оборудовали ее у ст. м. «Немига» со стороны Верхнего города (в начале ул. Богдановича по направлению к ул. Я.Купалы).
Мультифункциональную конструкцию накануне Дня города открыли представители компании, реализующей социально ориентированный проект «Код города».
Он призван повысить уровень комфорта и безопасности на улицах столицы, сделать ее пространство социально ориентированным, в том числе с помощью IT-технологий, помогающих управлять городской инфраструктурой.
– Эта интерактивная остановка – первый в Минске, уникальный для Беларуси и многих других стран, современный программно-аппаратный комплекс, –
Новая конструкция довольно необычна.
Наверняка многие минчане первое время будут посещать это место просто из любопытства. Между прочим, по некоторым данным, через этот остановочный пункт могут проходить в среднем 300–400 тыс. человек в сутки (с учетом пассажиров на остановке, туристов, пешеходов, велосипедистов, тех, кто едет на гироскутерах и т. д.).
Оказывается, ожидание транспорта может быть приятным и нескучным. А чтобы опробовать все функции интерактивной остановки, 5–10 минут не хватит…
Здесь многое кажется интересным. Например, размеры и конструкция остановочного павильона: его общая площадь 40 кв. м, длина 14 м. Всё оборудование остановки защищено антивандальным корпусом. Он, кстати, металлический, с элементами триплекс-стекла. Павильон состоит из двух боковых секций и центрального сегмента с банковской и вендинговой зоной самообслуживания, которая, к слову, работает круглосуточно. Оплата в ней производится и наличными с выдачей сдачи, и по безналу.В каждом крыле остановочного павильона размещены по четыре розетки для зарядки USB-аппаратуры.
Как рассказали представители компании, реализующей проект, позже, возможно, здесь появятся и устройства для зарядки электроскутеров (сегвеев).Для горожан и гостей столицы немаловажный фактор — надежная защита от дождя и ветра. Этим качеством остановочных павильонов большинство подобных конструкций Минска не обладает. Помимо этого, на новой остановке удобные деревянные скамейки, ночная подсветка (свет зажигается автоматически, когда темнеет).
Наверняка одной из самых востребованных функций умной остановки станет ее информационная составляющая. Прямо здесь с помощью мониторов можно узнать:
— о прибытии на конкретную остановку общественного транспорта, о проходящих через нее маршрутах;
— об изменениях в работе общественного транспорта, о стоимости проезда;
— о чрезвычайных ситуациях;— о городе с помощью интерактивной карты (на ней нанесены культурные объекты, точки общепита, банки, аптеки и т.
д.)
— распланировать маршрут на сенсорной карте или найти в интерактивной афише событие по вкусу.
Для людей с ограниченными физическими возможностями установлено светодиодное табло, которое будет оповещать водителя общественного транспорта о нахождении инвалида на остановке.
– Мы проработали эту функцию и передали эстафету городу, – рассказала заместитель директора по маркетингу и рекламе проекта «Код города» Светлана Новикова. – Чтобы она сработала, человеку нужно нажать на специальную кнопку, табло загорается, и водитель автобуса или троллейбуса видит, что на остановке находится человек с инвалидностью, и нужно продлить время нахождения на остановке. Водители проинформированы на сей счет.
Безопасности на интерактивной остановке уделено особое внимание. Несколько камер видеонаблюдения установлены таким образом, что появление непросматриваемых зон исключено. А для связи со спецслужбами имеется экстренная кнопка.
В боковых секциях – два небольших монитора с тач-скрином.
Это, как нам пояснили, сервис вызова такси одной из служб, правда, начнет работать он несколько позже.
— В каких местах города и когда могут появиться подобные конструкции в перспективе? — поинтересовались мы у представителей компании.
— Наша рабочая группа разработала линейку остановочных павильонов различных габаритов, рассчитанных на разные пассажиропотоки, — рассказала С.Новикова.— Мы нацелены развивать, масштабировать этот проект и дальше. Сейчас ведем переговоры с администрацией Заводского района, где заинтересовались этой идеей. А дальше будем ждать очередного аукциона на право взять в аренду площадки для подобных объектов.
Фото Сергея Пожоги
Интерактивная остановка в Гомеле оказалась халтурой
В преддверии Дня города в Гомеле у фабрики «8 Марта» появился ультрасовременный интерактивный остановочный пункт общественного транспорта, который стал своеобразным подарком городских властей горожанам к празднику.
Разработчик проекта — белорусская компания «АйТиПромСтрой». Впервые проект был показан в апреле текущего года на выставке «ТИБО-2016» в Минске. Презентуя его, создатели заверили, что «умная остановка» — это чисто белорусский продукт.
«Корпус сделан на «Белкоммунмаше», мониторы — производства витебского предприятия «Конструкторское бюро «Дисплей». IT-начинка тоже отечественная. Включает встроенный платежный терминал, «антивандальные» информационные табло, мониторы для рекламы, видеокамеры, тревожную кнопку», — рассказывал на презентации руководитель проекта Дмитрий Пахомов.
В верхнюю панель презентационного варианта были встроены светильники, работающие на солнечных батареях. В таком виде остановка экспонировалась и на «Белкоммунмаше», где в конце лета обсуждалась тема электробусов, которые выйдут на белорусские маршруты в конце этого года. Однако в Гомеле представлен «облегченный вариант»: из спецификации вычеркнули освещение, зарядку для электробусов, усилитель сигнала мобильных операторов, санитарной кабиной павильон тоже не оснастили.
Обещанная зона Wi-Fi пока в перспективе.
Как сообщает gomel.today, на торжественном открытии остановки присутствовали представители местных властей, которые разрезали символическую красную ленточку. Но вскоре после этого выяснилось, что новый интерактивный остановочный павильон оказался для гомельчан сплошным разочарованием.
Мало того, что он «растерял» большую часть своих ультрасовременных функций, так еще и не оправдал надежд горожан на то, что «ультрасовременная» остановка хотя бы надежно защитит их от атмосферных осадков и пронизывающего ветра. В сообществе «Это Гомель , детка!» появилось фото, на котором отчетливо видно, что павильон… банально протекает.
Гомельчане шутят, что остановка не протекает, а поддерживает комфортный уровень влажности.
Как отмечают пользователи, к тому же оставшаяся часть функций уже и не работает. «Я последнее время проезжал, монитор и свет всегда выключен. Батареек хватило только на время разрезания красной ленточки?» — интересуется Андрей Брагинец.
Умная остановка — ООО «ГИГ Инвест» — СУО, ВЕНДИНГ, СКС
Размести рекламу на первой умной остановке – стань частью проекта «Код города»!«Умная остановка» является частью проекта «Код города», который реализует наша компания. «ГИГ Инвест» – безальтернативный поставщик рекламных услуг на «умной остановке». В Минске первая такая остановка была установлена осенью 2019 года.
Первая интерактивная остановка на Немиге имеет большие рекламные возможности:
- Трансляция видеороликов на двух мониторах 46»;
- Реклама на мониторах 55», интеграция на интерактивную карту;
- Ситилайты и видеостены;
- Текстовая реклама на бегущей строке;
- Wi-fi реклама;
- Брендирование.
Реклама на мониторах 46»
На интерактивной остановке установлено 2 монитора, их особенность –улучшенная передача изображения.
Яркий дисплей передает четкую картинку в солнечную и пасмурную погоду.
Реклама на мониторах умной остановки продается пакетом – 2 монитора на месяц, 10 секундный ролик с ротацией в 10 минут.
Реклама на мониторах 55″ с интерактивной картой
На мониторы 55″ с интерактивной картой возможно интегрировать слайдеры. Реклама на мониторах умной остановки продается пакетом – 2 монитора на месяц.
Ситилайты и видеостены
Ситилайты – односторонний световой короб с рекламным изображением, которое круглосуточно подсвечивается светодиодами. Конструкция предназначена для передачи статичной информации. На «умной остановке» находится 4 ситилайта двух форматов: 1,3м х 1,3м и 0.9 х 1.6 м.
Рекомендации по печати: рекламный постер с полем для заливки, предпочтительно печатать на материале «беликт» с ламинацией без клеевого слоя. Стоимость размещения рекламы на ситилайтах включает монтаж и демонтаж рекламного изображения, печать в стоимость не входит.
На видеостенах возможно размещение рекламных видеороликах по 10 сек с ротацией в 10 минут.
Бегущая строка
Светодиодное табло в виде бегущей строки отображает сообщения в виде текста до 100 символов любого содержания. Реклама на бегущей строке продается пакетом на 2 дисплея на месяц.
Wi-fi реклама
Свободная зона доступа к Wi-Fi на остановке дает возможность показывать подключающимся к интернету пассажирам баннеры, видео и опросники.
Брендирование
Возможно брендирование одного или двух автоматов в вентинговой двух автоматов: VEND SHOP LONG (снеки, напитки) и VEND SHOP (охлажденные напитки).
Реклама на «умной» остановка может быть эксклюзивной. Это значит, что в период вещания вашего контента на конкретном рекламном носителе не будет транслироваться ваши конкуренты.
Кроме того, «умную» остановку можно забрендировать. Стоимость рассчитывается индивидуально.
Для получения консультации обращайтесь по телефонам или отправляйте заявки на электронную почту – наши специалисты свяжутся с вами.
+375-29-672-98-45
Этот адрес электронной почты защищён от спам-ботов. У вас должен быть включен JavaScript для просмотра.
Подробнее об интерактивной остановке на официальном сайте – CITYCODE.BY
Дорога без опасности
ТЕМЫ
Общие положения
Общие обязанности водителей
Обязанности пешеходов
Обязанности пассажиров
Применение специальных сигналов
Сигналы светофора и регулировщика
Применение аварийной световой сигнализации и знака аварийной остановки
Начало движения.
Маневрирование
Расположение транспортных средств на проезжей части
Скорость движения
Обгон, опережение, встречный разъезд
Остановка и стоянка
Проезд перекрёстков
Пешеходные переходы и места остановок маршрутных транспортных средств
Движение через железнодорожные пути
Движение по автомагистралям
Движение в жилых зонах
Приоритет маршрутных транспортных средств
Пользование внешними световыми приборами и звуковыми сигналами
Буксировка механических транспортных средств
Учебная езда
Перевозка людей
Перевозка грузов
Дополнительные требования к движению велосипедистов и водителей мопедов
Дополнительные требования к движению гужевых повозок, а также к прогону животных
Дорожные знаки и разметка
Всероссийские массовые мероприятия
ЕщеМосковское центральное кольцо
Московское центральное кольцо (МЦК) является совместным проектом ГУП «Московский метрополитен», ОАО «РЖД» и АО «МКЖД».
МЦК призвано стать неотъемлемой частью современной транспортной системы города, распределяющей пассажиропотоки столицы.
Схема Московского метрополитена и Московского центрального кольца (pdf)
Всего на Московском центральном кольце 31 транспортно-пересадочный узел, с каждого можно пересесть на наземный общественный транспорт. С обеих сторон железной дороги организованы удобные подъездные пути, разворотные площадки для автобусов, установлены новые остановки.
Запуск пассажирского движения на МЦК состоялся 10 сентября 2016 года. До 2020 года запланировано развитие прилегающих территорий к ТПУ МЦК. Заброшенные ранее промышленные зоны получат новый виток развития, будут построены деловые и торговые центры, апарт-отели, жилые дома. Благодаря развитию транспортной инфраструктуры, доступность многих районов значительно улучшится.
Всего по МЦК в сутки курсируют в рабочие дни 242 пары поездов «Ласточка», а в выходные – 211 пар.
Вместимость 1500 пассажиров, электропоезда «Ласточка» приспособлены для маломобильных групп населения, пассажиров с детьми, удобны для провоза велосипедов, колясок. Поезда оснащены туалетами, системами климат-контроля и Wi-Fi. Организация пассажирских перевозок по МЦК возложена на ГУП «Московский метрополитен», перевозчиком является ОАО «Российские железные дороги». В часы пик электрички по кольцу ходят каждые четыре минуты, а во внепиковое время — каждые 8. При этом часы пик отличаются в будни и в выходные. В рабочие дни их два: с 07:30 до 11:30 и с 16:00 до 21:00. А по субботам, воскресеньям и праздникам пиковым считается интервал с 12:30 до 18:00.
Пересадка на МЦК бесплатна в течение 90 минут с момента первого прохода в метро.
В Гродно появится первая интерактивная остановка общественного траспорта
Интерактивные остановки общественного транспорта под названием «Код города» устанавливают в регионах Беларуси, сообщила корреспонденту БЕЛТА дизайнер компании-разработчика «Айтипроектстрой» Светлана Новикова.
Интерактивная остановка в Гомеле, фото: onliner.by
Первая такая остановка появилась в Гомеле. Компания передала городу павильон на безвозмездной основе. У остановки есть закрытая и открытая зоны. Интерьер состоит из скамейки с подогревом, двух мониторов в антивандальном исполнении, системы видеонаблюдения и экстренной связи.
Внутри павильона встроен монитор с сенсорным экраном, на котором можно проложить маршрут. Второй монитор предназначен для вывода данных о времени прибытия общественного транспорта.
Интерактивная остановка в Гомеле, фото: onliner.by
Снаружи установлен большой дисплей, который выступает в качестве рекламной площадки. В вечернее и ночное время включается светодиодное освещение.
— В последующем мы планируем установить интерактивные остановки во всех областных городах Беларуси. На очереди — Могилев и Гродно. Причем это будут остановки в другой комплектации: с индивидуальным «Кодом города».
Предусматривается обеспечить и доступ в интернет по технологии Wi-Fi, — добавила Светлана Новикова.
Павильон демонстрировался на выставках техники и электроники «Тибо», «Белагро» и Белорусском транспортном форуме, а также на выставке разработок по интеллектуальным информационным системам и технологиям во время 15-й международной конференции «Развитие информатизации и государственной системы научно-технической информации — 2016» в Объединенном институте проблем информатики Национальной академии наук Беларуси.
БелТА
Нашли опечатку? Выделите фрагмент текста с опечаткой и нажмите Ctrl + Enter.
ДНК-полимеразный стоп-анализ для соединений, взаимодействующих с G-квадруплексом | Исследование нуклеиновых кислот
Аннотация
Мы разработали и охарактеризовали анализ взаимодействующих с G-квадруплексом соединений, в котором используется тот факт, что G-богатые ДНК-матрицы представляют препятствия для синтеза ДНК ДНК-полимеразами.
Используя ДНК-полимеразу Taq и G-квадруплекс, связывающий 2,6-диамидоантрахинон BSU-1051, мы обнаружили, что BSU-1051 приводит к усиленной остановке синтеза ДНК в присутствии K + за счет стабилизации внутримолекулярной структуры G-квадруплекса. образована четырьмя повторами TTGGGG или TTAGGG в матричной цепи.Эти данные предоставляют дополнительные доказательства того, что BSU-1051 модулирует активность теломеразы путем стабилизации теломерной G-квадруплексной ДНК и указывает на анализ остановки полимеразы как на чувствительный метод для скрининга агентов, взаимодействующих с G-квадруплексом, с потенциальной клинической полезностью.
Введение
G-богатая ДНК, как известно, предполагает высокостабильные структуры, образованные парами оснований Хугстина между остатками гуанина (1,2). Эти структуры, известные как G-quadruplexes, стабилизируются в присутствии K + и могут иметь биологические роли, которые еще предстоит определить (3-5).
Одна конкретная область генома, где эти структуры могут играть важную биологическую роль, находится на концах хромосом, где в норме обнаруживается G-богатая ДНК (например, тандемные повторы TTAGGG и TTGGGG в клетках человека и инфузории Tetrahymena , соответственно) (3, 6,7). Кроме того, недавно был идентифицирован ряд генов, содержащих G-богатую ДНК, и было высказано предположение, что богатые G области в этих генах могут регулировать экспрессию генов путем формирования структур G-квадруплексов (8-11).Одна потенциальная биологически значимая роль G-квадруплексной ДНК — это барьер для синтеза ДНК (12). Этот барьер был тщательно исследован и оказался зависимым от K + (13). Это наблюдение убедительно свидетельствует о том, что образование видов G-квадруплексов отвечает за наблюдаемый эффект на синтез ДНК (14).
Недавно мы показали, что 2,6-диамидоантрахинон BSU-1051 модулирует активность теломеразы человека по механизму, который зависит от удлинения теломерного праймера d (TTAGGG) 3 до длины, которая затем способна образовывать внутримолекулярный G-квадруплексная структура (15).
Здесь мы показываем, что BSU-1051, благодаря его взаимодействию с G-квадруплексной ДНК, усиливает блокировку синтеза ДНК структурой G-квадруплекса в присутствии K + .
Материалы и методы
ДНК олигонуклеотиды
Последовательность удлинения праймера ДНК P18 (5′-TAATACGACTCACTATAG-3 ‘) и матричные последовательности, показанные в таблице 1, были синтезированы с использованием синтезатора PerSeptive Biosystems Expedite 8909 и очищены денатурирующими полиакриламидными гелями.Матричную ДНК разбавляли до 5 нг / мкл и разливали на небольшие аликвоты.
Анализ защиты от метилирования DMS
Шаблоны PQ74 и HT4, меченные 32 P, денатурировали нагреванием при 90 ° C в течение 5 минут, а затем охлаждали до комнатной температуры в 50 мМ трис-HCl буфере с или без 100 мМ K + . Один микролитр диметилсульфата (DMS), разбавленного 1: 4 этанолом, добавляли к 1 мкг (300 мкл) отожженной ДНК.
Аликвоты отбирали в моменты времени, указанные на фигурах, и реакции модификации останавливали добавлением 1/4 об.стоп-буфера, содержащего 1 М β-меркаптоэтанол и 1,5 М ацетат натрия. Продукты модификации дважды осаждали этанолом и обрабатывали пиперидином. После осаждения этанолом продукты расщепления разделяли на 16% полиакриламидном геле.
Анализ остановки синтеза ДНК
Этот анализ является модификацией теста, описанного Weitzmann и соавторами (14). Вкратце, праймеры (P18, 24 нМ), меченные γ- 32 P, смешивали с матричной ДНК (12 нМ) в буфере Tris-HCl (10 мМ Tris, pH 8.0), содержащий K + (5 мМ для шаблона PQ74 и 50 мМ для шаблона HT4) и денатурированный нагреванием при 90 ° C в течение 5 мин. После охлаждения до комнатной температуры добавляли BSU-1051 в различных концентрациях и инкубировали при комнатной температуре в течение 15 минут. Реакции удлинения праймера инициировали добавлением dNTP (конечная концентрация 100 мкМ), MgCl 2 (конечная концентрация 3 мкМ) и ДНК-полимеразы Taq (2,5 ед.
/ Реакцию; Boehringer Mannheim). Для секвенирования реакций использовали систему секвенирования TaqTrack (Promega).Буфер реакции секвенирования был изменен на 50 мМ Трис-HCl, pH 9,0, 10 мМ MgCl 2 и 50 мМ K + . Реакции останавливали добавлением равного объема стоп-буфера (95% формамид, 10 мМ EDTA, 10 мМ NaOH, 0,1% ксилолцианола, 0,1% бромфенолового синего). Для температурно-зависимых экспериментов концентрацию лиганда фиксировали, и реакции удлинения праймера проводили при температурах, указанных на фиг. 4. Продукты разделяли на 12% -ном полиакриламидном геле для секвенирования.Затем гели сушили и визуализировали на PhosphorImager (модель Molecular Dynamics 445 S1).
Таблица 1
последовательностей матрицы ДНК, используемых в этом исследовании
Таблица 1
последовательностей матрицы ДНК, используемых в этом исследовании
Результаты
G-богатые области шаблонов PQ74 и HT4 образуют межмолекулярные G-квадруплексные структуры в буфере K
+ Чтобы определить природу структур G-квадруплексов, образованных матричными последовательностями, используемыми в этом исследовании (таблица 1), DMS использовали для исследования доступности N7 гуанина в матрицах ДНК (16). Как показано на Фигуре 1A, когда матрица PQ74 была метилирована в буфере 1 × TE, не было очевидной защиты какого-либо гуанина N7. Однако, за исключением первого гуанина в каждом из четырех повторов TTGGGG, все гуанины в G-богатой области шаблона PQ74 защищены от реакции с DMS в 100 мМ буфере K + , тогда как гуанины находятся за пределами четыре повтора сильно реагируют с DMS. Этот паттерн защиты DMS для G-богатой области матрицы PQ74 в буфере K + предполагает, что только три гуанина в каждом из четырех повторов TTGGGG участвуют в образовании G-тетрад.Этот паттерн реакции DMS отличается от паттерна, наблюдаемого ранее Хендерсоном и соавторами (17) с d (TTGGGG) 4 G-квадруплекс, в котором только первый гуанин третьего повтора (соответствующий G9 в матрице PQ74 ) является сверхчувствительным к метилированию DMS. На основе результатов нашего исследования мы предлагаем модель структуры G-квадруплекса, образованной G-богатой областью последовательности PQ74, состоящей из d (TTGGGG) 4.
В этой модели первый гуанин первого повтора (G1 в таблице 1 и на рис.1B) расположен в области 5′-выступа и, следовательно, открыт для метилирования DMS. Однако первые гуанины второго, третьего и четвертого повторов (G5, G9 и G13 соответственно) расположены в петлевых областях G-квадруплекса. Хотя группы N7 этих трех петлевых гуанинов не участвуют в водородных связях, стерическая недоступность может защитить их от метилирования DMS. Паттерн следа DMS показывает, что хотя они частично защищены от метилирования DMS, эта защита меньше, чем у других гуанинов в повторе.
Рисунок 1
Защита от метилирования DMS шаблона PQ74 в буфере K + . ( A ) Авторадиограмма денатурирующего геля PAGE, показывающая картину метилирования DMS в буфере TE (дорожки 1–5) и 100 мМ K + (дорожки 6–10). Скобки I-IV указывают на четыре последовательности теломерных повторов. ( B ) Предлагаемая модель G-квадруплекса, сформированная шаблоном PQ74.
Рисунок 1
Защита от метилирования DMS шаблона PQ74 в буфере K + .( A ) Авторадиограмма денатурирующего геля PAGE, показывающая картину метилирования DMS в буфере TE (дорожки 1–5) и 100 мМ K + (дорожки 6–10). Скобки I-IV указывают на четыре последовательности теломерных повторов. ( B ) Предлагаемая модель G-квадруплекса, сформированная шаблоном PQ74.
Повторы TTAGGG в G-богатой области шаблона HT4 также показали высокую защиту от метилирования DMS в буфере K + (данные не показаны). В этом конкретном случае все три гуанина в каждом повторе были почти равномерно защищены от метилирования, что указывает на то, что все они участвуют в образовании G-тетрад.Этот паттерн метилирования DMS согласуется с внутримолекулярной структурой G-квадруплекса, предложенной Пателем и соавторами для последовательности d [AG 3 (T 2 AG 3 ) 3 ] на основе исследований ЯМР (18) .
Рисунок 2
BSU-1051 зависимый от концентрации блок синтеза ДНК полимеразы Taq G-квадруплексной структурой, сформированной на матрице PQ74 при 55_C. ( A ) Авторадиограмма геля для секвенирования, показывающая усиление синтеза ДНК, приостанавливающееся на сайте G-квадруплекса при увеличении концентрации BSU-1051 (дорожки 1-8).Стрелки указывают положения полноразмерного продукта синтеза ДНК, сайта паузы G-квадруплекса и свободного праймера. ( B ) Количественный анализ геля с использованием программного обеспечения ImageQuant. По оси y показано отношение радиационного объема в местах остановки к общему радиационному объему дорожки. Активность полимеразы Taq нормализована по всем продуктам удлинения праймера, включая преждевременные продукты, продукты паузы G-квадруплекса и продукты полной длины.
Рисунок 2
BSU-1051 зависимый от концентрации блок синтеза ДНК полимеразы Taq G-квадруплексной структурой, сформированной на матрице PQ74 при 55_C.
( A ) Авторадиограмма геля для секвенирования, показывающая усиление синтеза ДНК, приостанавливающееся на сайте G-квадруплекса при увеличении концентрации BSU-1051 (дорожки 1-8). Стрелки указывают положения полноразмерного продукта синтеза ДНК, сайта паузы G-квадруплекса и свободного праймера. ( B ) Количественный анализ геля с использованием программного обеспечения ImageQuant. По оси y показано отношение радиационного объема в местах остановки к общему радиационному объему дорожки. Активность полимеразы Taq нормализована по всем продуктам удлинения праймера, включая преждевременные продукты, продукты паузы G-квадруплекса и продукты полной длины.
BSU-1051 связывается с G-квадруплексом ДНК и блокирует синтез ДНК в зависимости от концентрации
Хотя было показано, что структуры G-квадруплекса блокируют удлинение праймера ДНК-полимеразой в зависимости от K + (14), нам неизвестны какие-либо отчеты, показывающие усиленное блокирование взаимодействующими с G-квадруплексом агентами.
Чтобы определить, усиливает ли связывание BSU-1051 с G-квадруплексом блокировку синтеза ДНК, реакции удлинения праймера проводили в отсутствие и в присутствии BSU-1051.На рисунках 2A и 3A показаны результаты удлинения праймера ДНК-полимеразы Taq на ДНК-матрицах, содержащих четыре повтора либо TTGGGG (PQ74, фиг. 2A), либо TTAGGG (HT4, фиг. 3A) в присутствии различных концентраций BSU-1051. при 55 ° С. В этих экспериментах K + добавляли в низких концентрациях (5 мМ K + для шаблона PQ74 и 20 мМ K + для шаблона HT4), чтобы предотвратить подавляющую паузу полимеразы из-за образования высокостабильного G -квадруплексные конструкции.В отсутствие BSU-1051 наблюдается лишь небольшая пауза ДНК-полимеразы Taq , когда она достигает 3′-конца G-богатого сайта на матричной ДНК при 55 ° C (рис. 2A и 3A, дорожки 1). Однако при увеличении концентрации BSU-1051 наблюдается усиленная пауза в том же месте, что и при низких концентрациях K + . Это говорит о том, что BSU-1051 усиливает паузу полимеразы, стабилизируя структуру G-квадруплекса, сформированную в буфере K + . При высоких концентрациях BSU-1051 мы не только наблюдали усиленную паузу на 3′-конце сайта G-квадруплекса, но также увеличивали преждевременную терминацию в результате неспецифических взаимодействий между BSU-1051 и одноцепочечной матричной ДНК (рис. 2А). и 3A, дорожки 7 и 8).При концентрации BSU-1051, равной 100 мкМ, удлинение праймера полностью ингибируется, предположительно из-за неспецифических взаимодействий между BSU-1051 и одно- и / или двухцепочечной ДНК или между BSU-1051 и самой полимеразой. В дополнение к первичному сайту паузы в начале сайта G-квадруплекса, два других вторичных сайта паузы во втором и третьем G-богатых повторах наблюдаются при высоких концентрациях BSU-1051. Эти паузы, вероятно, вызваны другими структурами, образованными этой богатой G последовательностью.Учитывая тот факт, что вторичные паузы за пределами первой G-тетрады не наблюдаются на дорожках секвенирования, которые содержат 50 мМ K + , вполне вероятно, что эти вторичные паузы вызваны шпилечными структурами, которые стабилизируются BSU-1051, но не K + . Это говорит о том, что BSU-1051 имеет относительно более высокое сродство к G-квадруплексной ДНК по сравнению с другими вторичными структурами ДНК или одно- и двухцепочечной ДНК.
Остановка синтеза ДНК квадруплексным комплексом BSU-1051-G зависит от стабильности структуры G-квадруплекса
Для дальнейшей оценки способности BSU-1051 стабилизировать G-квадруплекс ДНК, реакции удлинения праймера ДНК-полимеразы Taq проводили при пяти различных температурах в присутствии и в отсутствие BSU-1051.Как показано на рисунке 4A, в отсутствие полимеразы BSU-1051 пауза на матрице PQ74, содержащей четыре повтора TTGGGG, почти теряется при ∼65 ° C (дорожка 4), что предположительно является точкой плавления образованной структуры G-квадруплекса. этим богатым G участком матричной ДНК. С другой стороны, в присутствии 20 мкМ BSU-1051 структура G-квадруплекса дополнительно стабилизируется, и наблюдается значительная пауза до 74 ° C. В шаблоне HT4, содержащем четыре повтора TTAGGG, в котором сформированная структура G-квадруплекса предположительно менее стабильна, пауза исчезает при 55 ° C в отсутствие лиганда (рис.4Б, дорожка 3). Однако в присутствии BSU-1051 пауза наблюдается до 65 ° C (рис. 4B, дорожка 9). Таким образом, для обеих последовательностей ДНК Δ T m при добавлении 20 мкМ BSU-1051 составляет ∼20 ° C.
Рисунок 3
BSU-1051 зависимый от концентрации блок синтеза ДНК полимеразы Taq G-квадруплексной структурой, сформированной на матрице HT4 при 55 ° C. ( A ) Авторадиограмма геля для секвенирования, показывающая усиление синтеза ДНК, приостанавливающееся на сайте G-квадруплекса при увеличении концентрации BSU-1051 (дорожки 1-8).Стрелки указывают положения полноразмерного продукта синтеза ДНК, сайта паузы G-квадруплекса и свободного праймера. ( B ) Количественное определение геля с использованием программного обеспечения ImageQuant такое же, как на рисунке 2B.
Рисунок 3
BSU-1051 Зависимый от концентрации блок синтеза ДНК полимеразы Taq G-квадруплексной структурой, сформированной на матрице HT4 при 55 ° C. ( A ) Авторадиограмма геля для секвенирования, показывающая усиление синтеза ДНК, приостанавливающееся на сайте G-квадруплекса при увеличении концентрации BSU-1051 (дорожки 1-8).Стрелки указывают положения полноразмерного продукта синтеза ДНК, сайта паузы G-квадруплекса и свободного праймера. ( B ) Количественное определение геля с использованием программного обеспечения ImageQuant такое же, как на рисунке 2B.
Чтобы подтвердить, что паузы, показанные на фиг. 2A и 3A, являются результатом образования структуры G-квадруплекса на матричной ДНК, некоторые гуанины в матрице были заменены на 7-деаза-dG. Поскольку N7 гуанина участвует в водородных связях в образовании структуры G-квадруплекса, замена гуанина на 7-деаза-dG должна препятствовать образованию любой структуры G-квадруплекса и обеспечивать непрерывное удлинение праймера на матрице с помощью Taq. ДНК-полимераза в присутствии либо K + , либо BSU-1051.Как показано в таблице 1, два гуанина в повторяющейся области TTAGGG матрицы HT4 и четыре гуанина в повторяющейся области TTGGGG матрицы PQ74 были заменены на 7-деаза-dG. Это изменение позволит образовать не более двух внутримолекулярных G-тетрад и должно привести к дестабилизации внутримолекулярной структуры G-квадруплекса. Результаты удлинения праймера с этими замещенными 7-деаза-dG матрицами показывают, что не происходит значительных пауз ни в одной из матриц в присутствии до 20 мМ K + или при концентрациях BSU-1051 до 50 мкМ (данные не показаны). .Этот результат убедительно подтверждает вывод о том, что BSU-1051 связывается и стабилизирует внутримолекулярную G-квадруплексную ДНК, что приводит к выраженной остановке синтеза ДНК в сайте G-квадруплекса в исходных G-богатых матрицах.
Обсуждение
Сообщалось, чтоG-богатые последовательности, такие как теломерная ДНК и триплетная ДНК, образуют параллельные или антипараллельные G-квадруплексные структуры в присутствии одновалентных катионов, таких как Na + и K + .Уильямсон и его сотрудники наблюдали очень сильное внутримолекулярное сшивание в УФ-диапазоне для последовательности d (TTGGGG) 4 в 50 мМ буфере K + (5). Их результаты показывают, что эта последовательность образует внутримолекулярную структуру. Используя метилирование DMS, мы пришли к выводу, что четыре повтора TTGGGG или TTAGGG в не-богатой G последовательности способны образовывать внутримолекулярную структуру G-квадруплекса в буфере K + . Кроме того, результаты метилирования DMS показывают, что из возможных типов структур G-квадруплексов, которые могут быть образованы d (TTGGGG) 4 , структура, состоящая из трех G-тетрад, является преобладающим видом в 100 мМ K + буфере. .Предлагаемая структура G-квадруплекса, образованная d (TTGGGG) 4 , показанная на рисунке 1B, имеет диагональную петлю, но также возможна альтернативная внутримолекулярная структура G-квадруплекса, образованная складными шпильками, состоящими из трех G-тетрад (1,19, 20). Однако мы не смогли различить эти два разных типа внутримолекулярных структур G-квадруплекса только по паттерну метилирования DMS.
G-богатые последовательности, способные образовывать G-квадруплексы in vitro можно найти в теломерных последовательностях (21–23), областях переключения иммуноглобулинов (8), гене инсулина (9), контрольной области ретинобластомы. ген восприимчивости (10), промоторная область гена c- myc (11), триплетные повторы синдрома ломкой Х-хромосомы (2,24) и РНК ВИЧ-1 (25).Хотя прямые доказательства существования G-quadruplexes in vivo отсутствуют, способность этих важных последовательностей образовывать G-quadruplex структуры in vitro предполагает, что G-quadruplex DNA может играть важную роль в нескольких биологических событиях. Например, Сен и Гилберт предположили, что последовательности теломерной ДНК могут связываться, чтобы инициировать выравнивание четырех сестринских хроматид путем образования параллельных гуаниновых квадруплексов (26). Более того, открытие последовательностей, образующих G-квадруплекс в промоторной области некоторых генов, предполагает, что структуры G-квадруплекса могут играть роль в регуляции транскрипции этих генов.Другой возможной ролью G-квадруплексной ДНК является регуляция длины теломер, поскольку теломерный выступ, который формирует структуру G-квадруплекса, не может быть хорошим субстратом для теломеразы (27,28). Недавно мы продемонстрировали, что BSU-1051 ингибирует удлинение праймера теломеразой только тогда, когда субстрат (теломерная ДНК) достигает четырех или более повторов в длину (15). В этом отчете мы показываем, что BSU-1051 способен связываться и стабилизировать внутримолекулярную структуру G-квадруплекса, образованную четырьмя теломерными повторами.Таким образом, разумно предположить, что BSU-1051 ингибирует теломеразу, взаимодействуя с ее субстратом (теломерные повторы, образующие G-квадруплекс), а не с самой теломеразой. Если G-квадруплексные структуры играют важную роль в других биологических процессах, то G-квадруплекс-взаимодействующие соединения, такие как описанные здесь, которые стабилизируют эти структуры, могут иметь множество биологических эффектов. Сообщалось, что серия 2,6-диамидоантрахинонов, включая BSU-1051, снижает обычную цитотоксичность в ряде опухолевых клеток (29,30) и ингибирует теломеразу человека (31).Связывание этих соединений с G-квадруплексом обеспечивает возможный механизм их действия, хотя вероятны и другие механизмы, включающие нацеливание на дуплексную ДНК.
Рисунок 4
Температурно-зависимый блок синтеза ДНК G-квадруплексной структурой, сформированной на матрицах PQ74 и HT4 в отсутствие или в присутствии BSU-1051. ( A ) Авторадиограмма геля для секвенирования, показывающая повышенную термостойкость пауз G-квадруплекса в присутствии 20 мкМ BSU-1051 (сравните дорожки 1–5 с дорожками 6–10).Стрелки указывают положения полноразмерного продукта синтеза ДНК, сайта паузы G-квадруплекса и свободного праймера. ( B ) Авторадиограмма геля для секвенирования, показывающая паузы G-квадруплекса при более высоких температурах в присутствии 20 мкМ BSU-1051. Стрелки указывают положения полноразмерного продукта синтеза ДНК, сайта паузы G-квадруплекса и свободного праймера.
Рисунок 4
Температурно-зависимый блок синтеза ДНК с помощью структуры G-квадруплекса, сформированной на матрицах PQ74 и HT4 в отсутствие или в присутствии BSU-1051.( A ) Авторадиограмма геля для секвенирования, показывающая повышенную термостойкость пауз G-квадруплекса в присутствии 20 мкМ BSU-1051 (сравните дорожки 1–5 с дорожками 6–10). Стрелки указывают положения полноразмерного продукта синтеза ДНК, сайта паузы G-квадруплекса и свободного праймера. ( B ) Авторадиограмма геля для секвенирования, показывающая паузы G-квадруплекса при более высоких температурах в присутствии 20 мкМ BSU-1051. Стрелки указывают положения полноразмерного продукта синтеза ДНК, сайта паузы G-квадруплекса и свободного праймера.
Несмотря на отсутствие однозначных доказательств структуры комплекса BSU-1051-G-quadruplex, мы недавно предложили модель комплекса перилен-G-quadruplex, основанную на данных ЯМР (32). По аналогии с этой структурой и структурой, предложенной для структуры TMPyP4-G-квадруплекса (33), наиболее вероятно, что сайт связывания BSU-1051 находится вне нижней G-тетрады и внутри диагональной петли.
Блок синтеза ДНК G-квадруплексными структурами не зависит от полимеразы.Вудфорд с соавторами показали, что K + -зависимая остановка синтеза ДНК G-квадруплексными структурами сходна для различных полимераз (13). Мы обнаружили, что картина остановки синтеза ДНК, индуцированная BSU-1051, практически идентична при использовании ДНК-полимеразы Taq , ДНК-полимеразы I Escherichia coli (фрагмент Кленова) или обратной транскриптазы AMV (данные не показаны). Учитывая тот факт, что многие G-богатые последовательности ДНК способны образовывать G-квадруплексы in vitro (особенно некоторые гены и последовательности, связанные с раком, такие как c- myc и теломеры), G-квадруплекс обещает стать потенциальной мишенью. для противоопухолевой химиотерапии.Анализ остановки синтеза ДНК, описанный в этом отчете, представляет собой простой и быстрый метод идентификации взаимодействующих с G-квадруплексом агентов как потенциальных соединений-лидеров. Этот анализ остановки полимеразы также позволяет проводить внутреннее сравнение относительного связывания потенциальных взаимодействующих с G-квадруплексом соединений с одно- и двухцепочечными ДНК-мишенями. Это важное сравнение, которое может дать ключ к пониманию относительной цитотоксичности этих соединений.
Мы успешно использовали настоящий анализ для идентификации и характеристики других взаимодействующих с G-квадруплексом соединений, которые также являются ингибиторами теломеразы (32,33).Однако, поскольку не все ингибиторы теломеразы являются соединениями, взаимодействующими с G-квадруплексом, полезность настоящего анализа не в первую очередь в качестве скрининга ингибиторов теломеразы и не предназначена для замены прямого анализа ингибирования теломеразы. Скорее, этот анализ можно использовать для идентификации других взаимодействующих с G-квадруплексом соединений с потенциальной клинической полезностью или практического использования при изучении транскрипции, рекомбинации, общих нарушений и других биологических процессов, в которых могут быть задействованы структуры G-квадруплекса.
Благодарности
Мы благодарим доктора Стивена Нейдла за предоставление BSU-1051. Мы также благодарим других членов NCDDG за полезные обсуждения и Дэвида Бишопа за вычитку, редактирование и подготовку окончательной версии рукописи. Это исследование было поддержано грантами Национальных институтов здравоохранения (CA49751 для L.H. и CA77000 для M.S.) и грантом Национальной совместной группы по открытию лекарств (NCDDG, CA67760) Национального института рака.
Список литературы
1.,Анну. Rev. Biophys. Biomol. Struct.
,1994
, т.23
(стр.703
—730
) 2,,. ,J. Biol. Chem.
,1995
, т.270
(стр.28970
—28977
) 3,,,,. ,Ячейка
,1987
, т.51
(стр.899
—908
) 4,,,. ,Биохимия
,1997
, т.36
(стр.15428
—15450
) 5,,.,Ячейка
,1989
, т.59
(стр.871
—880
) 6,. ,Telomeres
,1995
Cold Spring Harbor, NY
Cold Spring Harbor Laboratory Press
7,. ,Proc. Natl Acad. Sci. США
,1993
, т.90
(стр.3393
—3397
) 8,. ,Природа
,1988
, т.334
(стр.364
—366
) 9,,. ,Дж.Мол. Эндокринол.
,1993
, т.10
(стр.121
—126
) 10,. ,Nucleic Acids Res.
,1992
, т.20
(стр.49
—53
) 11,,. ,Nucleic Acids Res.
,1998
, т.26
(стр.1167
—1172
) 12,,,. ,J. Biol. Chem.
,1996
, т.271
(стр.5208
—5214
) 13,,.,J. Biol. Chem.
,1994
, т.269
(стр.27029
—27035
) 14,,. ,J. Biol. Chem.
,1996
, т.271
(стр.20958
—20964
) 15,,,,,,,,. ,J. Med. Chem.
,1997
, т.40
(стр.2113
—2116
) 16,. ,Методы энзимол.
,1980
, т.65
(стр.499
—560
) 17,,.,Биохимия
,1990
, т.29
(стр.732
—737
) 18,. ,Структура
,1993
, т.1
(стр.263
—282
) 19,. ,J. Mol. Биол.
,1995
, т.251
(стр.76
—94
) 20,. ,Строение
,1994
, т.2
(стр.1141
—1156
) 21. ,Природа
,1991
, т.350
(стр.569
—573
) 22,. ,Природа
,1989
, т.342
(стр.825
—829
) 23,,,,. ,Природа
,1992
, т.356
(стр.126
—131
) 24,. ,Proc. Natl Acad. Sci. США
,1994
, т.91
(стр.4950
—4954
) 25,. ,Биохимия
,1993
, т.32
(стр.11453
—11457
) 26,. ,Природа
,1990
, т.344
(стр.410
—414
) 27,. ,Мол. Клетка. Биол.
,1989
, т.9
(стр.345
—348
) 28,,,. ,Природа
,1991
, т.350
(стр.718
—720
) 29,. ,J. Med. Chem.
,1988
, т.31
(стр.847
—857
) 30,,,,.,J. Med. Chem.
,1992
, т.35
(стр.1418
—1429
) 31,,,,,,. ,J. Med. Chem.
,1998
, т.41
(стр.3253
—3260
) 32,,,,,. ,Биохимия
,1998
, т.37
(стр.12367
—12374
) 33,,,,. ,J. Am. Chem. Soc.
,1998
, т.120
(стр.3261
—3262
)© 1999 Oxford University Press
Остановитесь и смотрите перед покупкой интерактивного плоского дисплея — Новости — Информация о компании
3W и 1H, которые вам необходимо знать!
Я считаю, что вы готовы войти в новый тип общения, чтобы представить свой учебный контент или поделиться офисными идеями более быстрым и интерактивным способом.Однако перед покупкой интерактивного плоского экрана (IFP) убедитесь, что на приобретенный вами IFP распространяется гарантия.
Согласно анкетному опросу, одной из наиболее тревожных проблем для потребителей после покупки IFP является гарантийный ремонт. Если на ваш IFP не распространяется гарантия, решение проблемы технического обслуживания после возникновения неисправности потребует больших затрат рабочей силы и средств. Кроме того, в ожидании ремонта вам, возможно, придется подождать еще какое-то время, и это приведет к задержке вашего первоначального курса, расписания или плана встречи.
Таким образом, покупка интерактивной доски с гарантией является важной частью, которую необходимо подтвердить перед покупкой.
ViewSonic лидирует в отрасли по предоставлению полнофункциональной доски ViewBoard (серия IFP50) с трехлетней гарантией и ремонтом, который также включает разборку, транспортировку, ремонт и переустановку неисправного устройства (Примечание 1) бесплатно с гарантией в течение 48 часов (Примечание 2) для устранения вашей проблемы.
Сохраните презентации в классе или встречу от задержек!
Даже если ваш производитель предоставляет гарантию, подтвердили ли вы, что ваша гарантия является всеобъемлющей?
Большинство брендов интеллектуальных интерактивных досок предлагают трехлетнюю гарантию, но при той же трехлетней гарантии содержание может сильно отличаться.
Большинство интеллектуальных интерактивных досок приобретаются производителем для оказания бесплатной помощи при установке. Однако вы хотите заниматься разборкой и доставкой во время обслуживания?
Представьте себе интеллектуальную интерактивную доску размером от 55 до 80 дюймов, размер которой не может быть меньше размера или он тяжелый, поэтому ремонт и разборка больше не похожи на перемещение 10-килограммового проектора или ношение 27-дюймового экрана.
Когда ваша интеллектуальная интерактивная доска выходит из строя, то, как ее разобрать и отремонтировать, становится очень важной частью.
ViewSonic лидирует в отрасли, предлагая полный спектр ViewBoard (серия IFP50) в течение трех лет от ремонта до обслуживания, не только для того, чтобы гарантировать устранение проблем в течение 48 часов (примечание 2), но и для помощи при разборке неисправной машины. , транспортировка, ремонт и переустановка бесплатно (Примечание 1), чтобы вы были спокойны.
Если вы это проверили, мы уверены, что вы готовы войти в новый мир различных стилей общения. Мы уверены, что вам не терпится провести презентации и стимулировать инновационные офисные идеи более быстрым и интерактивным способом.
Какая гарантия вам нужна в дополнение к трехлетней гарантии и бесплатному демонтажу?
Для устранения проблемы решения аппаратных устройств, используемых в классе или в офисе, срочность времени не так проста, как отправить телевизор домой на несколько дней.
Минуты и секунды, потраченные на ремонт, значительно снизят успеваемость в классе или эффективность работы в конференц-зале. Как ИТ-персонал, вы не только должны часто отвечать на запросы о ходе технического обслуживания, но также можете быть рассмотрены начальником.Это не оставит хорошего впечатления.
В ответ на эту проблему ViewSonic запустила 48-часовое техническое обслуживание для всего диапазона ViewBoard (серия IFP50). Инженеры выезжают на площадку, чтобы решить проблему на максимальной скорости. Если проблема не может быть устранена на месте, мы будем нести ответственность за разборку и доставку вашего интерактивного дисплея на станцию ремонта и поможем устранить проблемы в кратчайшие сроки, чтобы ваше оборудование не повлияло на ваши образовательные обязанности или рабочие презентации из-за неисправности.
Теперь давайте послушаем учителей и ИТ-специалистов, которые испытали на себе трехлетнюю гарантию от ViewSonic, бесплатную разборку и ремонт и 48-часовую TAT-услугу . Узнайте, как ViewSonic может повысить свою производительность и решить сложные проблемы с обслуживанием!
Тайбэй, Тайвань, учитель Ванеса
48-часовое устранение препятствий, предоставленное ViewSonic, действительно мне очень помогло.
Этот день был как раз накануне собрания Ассоциации.Учащиеся и другие учителя подготовили много презентационного контента, который требовал взаимодействия с учащимися через планшет и IFP в этот день и позволял родителям, которые редко приходят в школу, участвовать в повседневном учебном процессе.
Неожиданно, когда мы готовились к последнему упражнению в тот же день, мы обнаружили, что IFP не может быть включен должным образом!
Оперативно позвонив в центр обслуживания клиентов ViewSonic, обслуживающий персонал во второй половине того же дня быстро направился в школу для проверки, и ремонт машины был завершен на месте!
Когда был включен интеллектуальный интерактивный дисплей, ученики в классе и другие учителя были так счастливы, что мы смеялись и смеялись.Что может быть лучше, чем вдохновлять и поощрять образование таким образом?
Сингапур, IT Стивен
Когда мне позвонил генеральный менеджер, он сказал мне, что что-то странное с сенсорной функцией IFP, установленной в его офисе, я чуть не побежал в офис генерального менеджера, чтобы помочь решать проблему.
После нескольких тестов, чтобы убедиться, что это не проблема системы, я решил немедленно позвонить в службу поддержки клиентов ViewSonic, чтобы запросить услуги ремонта.
Служба поддержки ViewSonic любезно согласовала со мной время ремонта, поэтому мы организовали осмотр и техническое обслуживание в течение двух дней командировки генерального директора.
Утром при проверке разборки выяснилось, что необходимо вернуть его на СТО для замены деталей. Машина была быстро упакована в соответствующий защитный упаковочный материал, и обслуживающий персонал отнес ее в ремонт.
На следующее утро я получил уведомление от персонала службы поддержки клиентов, в котором говорилось, что они могут вернуть машину во второй половине дня.Вскоре после установки машины в офис только что прибыл генеральный директор, чтобы подготовиться к деловой встрече.
Я никогда не забуду улыбку, которую дал мне генеральный директор, когда увидел, что умная интерактивная доска снова работает хорошо.
(Примечание 1) установка де / повторной установки ограничена высотой до 10 метров
(Примечание 2) 48 часов, исключая вопросы клиента и время отмены установки
ViewSonic Premium IFP Гарантия Продление гарантии до 5-го года
Интерактивные карты DelDOT — Департамент транспорта штата Делавэр
Вместимость
Задержка
0-8%Без задержки
8-15% 15-25% 25–35%Незначительная задержка
35–45% 45–95%Основная задержка
95-100%Стоп и вперед
Определения данных трафика
Средняя скорость
Средняя скорость всех транспортных средств, проезжающих по участку дороги за пятиминутный период.
Объем (5 мин)
Общее количество транспортных средств, проезжающих через участок дороги за пятиминутный период. Указанный процент отражает текущий уровень максимальной емкости.
Максимальный объем (5 мин)
Расчетное максимальное количество транспортных средств, которое участок дороги может принять в течение пятиминутного периода до возникновения задержек.
Прогнозируемый объем (1 час)
Прогнозируемое количество автомобилей, которые будут проезжать по участку дороги в час. Одна полоса движения может принимать от 1800 до 2000 автомобилей в час.
Транспортных средств в час
Максимальный объем транспортных средств на полосе движения, который может вместить участок дороги до того, как произойдет задержка.
Максимальный объем (1 час)
Расчетный максимальный часовой объем дороги, который может пройти участок дороги до того, как произойдет задержка.
Вместимость (5 мин)
Пятиминутный средний процент времени, в течение которого зона обнаружения занята.
Оккупировано (5 мин)
Общее время в секундах в течение пятиминутного периода, когда зона обнаружения занята.
Объем + вместимость
Сумма пятиминутного процента объема и процента занятости.Используется компьютеризированной сигнальной системой DelDOT для определения соответствующих требований к сигналу, связанных со спросом на трафик.
Интерактивный ресурс для управления временем, чтобы вы перестали слышать: «Мы уже закончили?»
Этот пост изначально был опубликован в блоге «Всегда учитель» и «Навсегда мама».
Мы уже закончили? Сколько раз вы слышали этот вопрос, работая с маленькими детьми?
В частности, если вы работаете в небольшой группе, как я, как репетитор, этот вопрос является довольно частым.Неважно, насколько весело детям. Неважно, сколько работы они на самом деле делают. Даже неважно, только что они начали сеанс. Как только вы закончите одно действие, этот вопрос просто слетает с их губ, и все, что вы можете сделать, это не вздохнуть, лол.
Мы уже закончили?
Нет, у нас еще есть дела. И если вы похожи на меня, вы, вероятно, объедините несколько небольших занятий в одно занятие, чтобы сохранить мотивацию ребенка.Итак, каждый раз, когда вы что-то заканчиваете, возникает страшный вопрос !! 000
Мы уже закончили?
Изучая исследования, вы, вероятно, обнаружите, что это в основном связано с потребностью детей управлять своим временем. Они не обязательно имеют представление о том, сколько времени прошло. Для них один период в пять минут может занять столько же, сколько и период в 15 минут. Они знают, что должны работать с вами в течение часа, но что именно это означает?
Принимая это во внимание, я решил создать интерактивный ресурс для управления временем.Да, я заглянул в эти причудливые таймеры, полные красок и наворотов. Но вы видели их цены ??? Нет, не для меня
Я создал эти простые полоски с красочными персонажами, которые мои ученики ОБОЖАЮТ! Они действительно с нетерпением ждут их, смеется.
Каждая полоса разделена на определенное количество секций (у меня 3, 4, 5, 6, 7 и 8), которые соответствуют количеству действий, которые я планирую для каждой сессии.
Дети взаимодействуют с ними, вставляя прищепки в каждую секцию, как только мы завершаем задание.Я купил свой в местном долларовом магазине. Приятно слышать, как они говорят: «Хорошо, осталось только шесть! Я почти на месте!»
Визуальный аспект этих полосок позволяет им фактически рационализировать количество времени, которое им еще нужно для работы. Это создает гораздо более расслабляющую атмосферу. А поскольку им обычно нравятся вещи, которые я для них готовлю, это также означает, что у них еще будет определенное количество занятий, которыми они могут насладиться! 000
Если вам нужна копия этих полосок, пожалуйста, возьмите их в моем магазине TpT! Щелкните изображение ниже, чтобы перейти непосредственно на страницу загрузки моего «Готово ли мы?» полоски тайм-менеджмента!
Пожалуйста, поделитесь, если вы когда-либо использовали эти полоски со своими учениками.Я хотел бы услышать, как они сработали для вас.
Береги себя,
Катя
***
Катя — учитель, родилась в Португалии и 13 лет живет в Канаде. В сфере образования работает 18 лет. Катя ведет блог в блоге «Всегда учитель и навсегда», где она делится своими мыслями об образовательных методах, занятиях, которые можно использовать в образовательном контексте, и уроках по различным ремеслам.Время от времени вам может даже повезти, если она поделится фотографиями некоторых из ее творений по выпечке 🙂 Катя — очень творческий / артистичный человек и очень любит создавать учебные ресурсы, которые будут полезны для учителей и интересны для студентов. В ее магазине TpT вы можете найти как обучающие материалы, так и картинки. Не стесняйтесь подписываться на нее в TpT, Facebook, Twitter, Instagram и / или Pinterest! »
Самовоспроизводящиеся или интерактивные презентации Keynote на Mac
Вы можете настроить презентацию на автоматическое продвижение, как при просмотре фильма, без необходимости взаимодействия.Или вы можете настроить интерактивную презентацию, которая меняет слайды только тогда, когда зритель нажимает на ее ссылки. Вы также можете настроить воспроизведение презентации при ее открытии, непрерывное воспроизведение в цикле и перезапуск, если презентация бездействует в течение определенного периода времени.
Эти параметры особенно полезны, когда презентация воспроизводится в условиях киоска.
Создайте интерактивную презентацию или презентацию, которая продвигается автоматически.
Открыв презентацию, щелкните вкладку «Документ» на боковой панели «Документ».
Выберите любые параметры воспроизведения:
Автоматически воспроизводить при открытии: Воспроизведение презентации начинается сразу после ее открытия.
Циклическое слайд-шоу: Презентация воспроизводится непрерывно. Чтобы превратить вашу презентацию в самовоспроизводящийся цикл, обязательно выберите Self-Playing во всплывающем меню Presentation Type, как описано в шаге 3.
Перезапустить шоу, если оно неактивно для: Используйте стрелки для установки время простоя перед перезапуском презентации.Если презентация воспроизводится и не было никакого взаимодействия с экраном по прошествии определенного периода времени, презентация вернется к первому слайду.
Щелкните всплывающее меню Тип презентации, затем выберите один из следующих вариантов:
Только ссылки: Изменяет слайды только тогда, когда докладчик (или зритель) щелкает ссылку.
Самовоспроизведение: Автоматическое продвижение вперед без необходимости взаимодействия. Чтобы изменить задержку между переходами слайдов или между эффектами сборки, используйте элементы управления рядом с параметром «Задержка».
Чтобы вернуться к поведению по умолчанию при смене слайдов с помощью клавиш «Стрелка вправо» и «Стрелка влево», выберите «Нормальный».
Чтобы воспроизвести презентацию, щелкните, чтобы выбрать слайд, с которого нужно начать, в навигаторе слайдов, затем щелкните на панели инструментов.
Интерактивная автобусная остановкаrombout frieling lab имеет вращающиеся блоки, которые служат ветровыми стеклами.
, чтобы сократить использование автомобилей, города по всему миру стремятся увеличить объем общественного транспорта, внедряя электрические автобусы и другие средства., чтобы изменить дизайн электрического автобуса, исследовательские институты sweden попросили rombout frieling lab спроектировать экспериментальную автобусную станцию, которая изменит опыт ожидания, особенно в суровых климатических условиях Умео.
все изображения — Самуэль Петтерссон
дублированная станция из , эта автобусная остановка, созданная лабораторией rombout frieling lab, призвана освободить путешественников от обязанности искать автобус и вместо этого дает им время быть ., станция отражает состояние автобусов через тонкое зрелище света и звуков, установленных на крыше, которое срабатывает всякий раз, когда автобус приближается к станции. Каждая автобусная линия имеет разную световую и звуковую конфигурацию: автобусы, идущие к старому стекольному заводу, звучат как стеклянный, в то время как раздаются голоса автобусов, следующих в центр города. Зрелище также видно издалека, информируя путешественников о статусе автобусов.
«Благодаря такой чувствительности станции путешественникам больше не нужно беспокоиться о том, чтобы забрать автобус», — комментирует rombout frieling lab. «они могут использовать время ожидания для себя, пока их вежливо разбудят».
, свисающие с крыши станции, — это несколько капсул, которые обеспечивают удобные возможности наклона. капсулы также помогают удерживать ветер, обеспечивая комфорт в неблагоприятных условиях без потребности в энергии. капсулы могут вращаться, что позволяет пользователям создавать различные конфигурации, которые подходят для социальных встреч или для наслаждения окружающей природой — потребность, которая была выражена путешественниками в процессе проектирования, в результате чего появилось открытое пространство.
информация о проекте:
имя: станция бытия
дизайнер: rombout frieling lab
расположение: швеция
исследовательские институты швеции — интерактивное соединениеjuliana neira I designboom
17 декабря 2019 г.
Хедж-фонды не могут перестать покупать Peloton Interactive, Inc.(PTON)
Мы знаем, что хедж-фонды генерируют сильную, скорректированную с учетом риска прибыль в долгосрочной перспективе, поэтому имитация выбора, на который они в целом настроены, может быть прибыльной стратегией для розничных инвесторов. Имея миллиарды долларов в активах, профессиональные инвесторы должны проводить сложный анализ, тратить много ресурсов и использовать инструменты, которые не всегда доступны для широкой публики. Это не значит, что у них нет случайных колоссальных потерь; они делают. Тем не менее, следить за деятельностью хедж-фондов — это все же хорошая идея.Имея это в виду, давайте рассмотрим отношение к Peloton Interactive, Inc. (NASDAQ: PTON) разумных денег и определим, умело ли хедж-фонды торговали этими акциями.
Peloton Interactive, Inc. (NASDAQ: PTON) входила в портфели 50 хедж-фондов в конце июня. Исторический максимум для этой статистики — 48. Это означает, что оптимистичное количество позиций хедж-фондов по этой акции в настоящее время находится на рекордно высоком уровне. В последнее время интерес хедж-фондов к PTON возрос. В нашей базе данных было 36 хедж-фондов с позициями PTON на конец первого квартала.Наши расчеты также показали, что PTON не входит в число 30 самых популярных акций среди хедж-фондов (нажмите, чтобы просмотреть рейтинг за второй квартал и просмотреть видео, чтобы быстро просмотреть 5 лучших акций).
Видео: посмотрите наш видеоролик о 5 самых популярных акциях хедж-фондов.
Для среднего инвестора существует множество индикаторов, которые участники рынка используют для оценки своих вложений в акции. Пара лучших индикаторов — это хедж-фонд и интерес к инсайдерской торговле.Мы показали, что исторически те, кто следит за лучшими выборами топ-менеджеров по управлению капиталом, могут превосходить своих сверстников, ориентированных на индекс, с очень впечатляющим отрывом (подробности см. Здесь).
COATUE MANAGEMENT
Филипп Лаффон из Coatue Management
В Insider Monkey мы изучаем множество источников, чтобы найти следующую отличную инвестиционную идею. Федеральная резервная система создает триллионы долларов в электронном виде, чтобы удерживать процентные ставки около нуля. Мы считаем, что это приведет к инфляции и росту цен на драгоценные металлы.Итак, мы проверяем эти акции младших золотодобывающих компаний .. Мы просматриваем списки, такие как 10 самых прибыльных компаний в Америке , чтобы выбрать для покупки лучшие акции с большой капитализацией. Несмотря на то, что мы рекомендуем позиции только в небольшой части анализируемых нами компаний, мы проверяем как можно больше акций. Мы читаем письма инвесторов хедж-фондов и слушаем презентации акций на конференциях хедж-фондов. Если вы хотите узнать, какие акции здравоохранения лучше всего покупать прямо сейчас, вы можете посмотреть наше последнее интервью с менеджером хедж-фонда здесь .Имея это в виду, мы собираемся проанализировать новые действия хедж-фондов вокруг Peloton Interactive, Inc. (NASDAQ: PTON).
История продолжается
Как хедж-фонды торгуют Peloton Interactive, Inc. (NASDAQ: PTON)?
В конце июня в общей сложности 50 хедж-фондов, отслеживаемых Insider Monkey, были оптимистичны по этой акции, что на 39% больше, чем в предыдущем квартале. На графике ниже показано количество хедж-фондов с бычьей позицией по PTON за последние 20 кварталов.Итак, давайте рассмотрим, какие хедж-фонды были среди основных держателей акций и какие хедж-фонды делали большие шаги.
Стоит ли покупать PTON?
Среди этих фондов Tiger Global Management LLC владела наиболее ценной долей в Peloton Interactive, Inc. (NASDAQ: PTON), которая на конец третьего квартала составляла 306,2 миллиона долларов. На втором месте — Coatue Management, владеющая акциями на сумму 297 миллионов долларов. Компании Woodson Capital Management, Renaissance Technologies и Darsana Capital Partners также очень понравились акции, став одним из крупнейших держателей хедж-фондов компании.Что касается веса портфеля, присвоенного каждой позиции, Woodson Capital Management придавала наибольший вес Peloton Interactive, Inc. (NASDAQ: PTON), около 16,46% ее портфеля 13F. Woodson Capital Management также относительно оптимистично смотрит на акции, отдав 10,23% своего портфеля акций 13F в пользу PTON.
По мере того, как интерес в отрасли резко возрос, управляющие ключевыми деньгами стали лидировать в стаде «быков». Darsana Capital Partners, управляемая Анандом Десаи, заняла самую крупную позицию в Peloton Interactive, Inc.(NASDAQ: PTON). На конец квартала Darsana Capital Partners инвестировала в компанию 144,4 миллиона долларов. Hitchwood Capital Management Джеймса Крайтона также открыла позицию на 75,1 млн долларов в течение квартала. Другими фондами с новыми позициями в акциях являются Zevenbergen Capital Investments Нэнси Зевенберген, Valiant Capital Кристофера Р. Хансена и Light Street Capital Глена Кахера.
Давайте теперь посмотрим на активность хедж-фондов в других акциях — не обязательно в той же отрасли, что и Peloton Interactive, Inc.(NASDAQ: PTON), но оценивается аналогичным образом. Мы рассмотрим CGI Inc. (NYSE: GIB), Fox Corporation (NASDAQ: FOX), Fox Corporation (NASDAQ: FOXA), Maxim Integrated Products Inc. (NASDAQ: MXIM), Laboratory Corp. of America Holdings (NYSE). : LH), Amcor plc (NYSE: AMCR) и Pioneer Natural Resources Company (NYSE: PXD). Рыночная капитализация всех этих акций соответствует рыночной капитализации PTON.
[таблица] Тикер, количество HF с позициями, общая стоимость HF позиций (x1000), изменение HF позиции GIB, 19,259686,1 FOX, 20,566122, -2 FOXA, 35,1611691, -3 MXIM , 33,323780,3 LH, 52,1579826,7 AMCR, 16,201571, -3 PXD, 35,341030, -5 Среднее, 30,697672, -0.3 [/ table]
Посмотрите таблицу здесь, если у вас возникнут проблемы с форматированием.
Как вы можете видеть, в этих акциях было в среднем 30 хедж-фондов с бычьими позициями, и средняя сумма, инвестированная в эти акции, составляла 698 миллионов долларов. В случае PTON эта цифра составила 2110 миллионов долларов. Лаборатория Corp. of America Holdings (NYSE: LH) — самые популярные акции в этой таблице. С другой стороны, Amcor plc (NYSE: AMCR) — наименее популярная компания, у которой всего 16 позиций бычьих хедж-фондов. Peloton Interactive, Inc.(NASDAQ: PTON) — не самые популярные акции в этой группе, но интерес хедж-фондов по-прежнему выше среднего. Наша общая оценка настроения хедж-фондов для PTON составляет 87,2. Акции с большим количеством позиций хедж-фондов относительно других акций, а также относительно их исторического диапазона получают более высокую оценку настроения. Наши расчеты показали, что 10 самых популярных акций хедж-фондов в 2019 году показали доходность 41,4% и превзошли S&P 500 ETF (SPY) на 10,1 процентных пункта. Эти акции выросли на 33% в 2020 году до конца августа и все еще опережают рынок на 23.2 процентных пункта. Хедж-фонды также были правы, сделав ставку на PTON, поскольку со второго квартала доходность акций составила 32,7%, и они превзошли рынок. Хедж-фонды были вознаграждены за их относительный оптимизм.